联系热线:025-66068668

首页 > 产品中心 > 体外受精试剂耗材

IVM未成熟卵培养液 M2115

体外受精试剂耗材 2021-01-13

 IVM未成熟卵培养液可用于在10-24小时内将未成熟卵(GV)培养至MII。其中添加了EGF、重组FSH可有效提高成熟率及受精率。

 品名型号规格有效期备注
 IVM未成熟卵培养液M211510ml/瓶12含BSA、双抗、FSH、EGF、酚红





保存条件及有效期:4-8℃避光冷藏有效期为3个月,-20℃冻存有效期为一年。

本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途

  产品图片

IVM.jpg

  使用方法

●-20℃冻存,室温或掌心加热解冻,请勿水浴加热,解冻期间反复颠倒混匀数次,请勿剧烈震荡。解冻后应4-8℃避光保存,开封后应在3周内用完。
●本产品出厂已通过鼠胚质控,由于可能存在运输及保存问题,本培养液解冻后必须做预实验验证。请勿分装冻存,分装可能会导致渗透压改变以及污染等问题。解冻后必须反复颠倒混匀,静置解冻后培养液会出现从上到下的浓度逐渐增加的渗透压梯度,用未混匀培养液会出现胚胎放入几小时后死亡的情况。
●使用前请做滴盖油,至少在CO2培养箱内平衡4小时,建议提前过夜平衡。
●本产品为即用型无菌培养液,已添加BSA、庆大霉素、酚红。
●可定制不同组分培养液。

  小鼠未成熟卵IVM方法(仅供参考)

●雌鼠注射PMSG 5-10IU/只, 48小时后杀鼠获取卵巢,在M2培养液中用1ml注射器针头或胰岛素针头反复戳卵巢至棉絮状,在皿底寻找类似于煎鸡蛋结构的未成熟卵coc(颗粒细胞没有扩散紧密包裹在卵母细胞周围)。

●如果需要获取GV阶段裸卵,用拉制的90-100um针反复吹打未成熟卵coc,机械性剥离颗粒细胞。注意此时不需要用透明质酸酶消化颗粒细胞,因为GV卵的颗粒细胞没有表达相应的透明质酸,因此无法用透明质酸酶消化GV卵COC,只能用机械剥离。

●将未成熟卵coc放入提前平衡的IVM培养液中培养16-18h。注意:未成熟卵coc是完整的颗粒细胞包裹GV卵的coc,不是GV裸卵,在皿底可以同时找到未成熟卵coc和GV裸卵,如果需要IVM培养,GV裸卵应该是废弃的,因为GV发育至MII,需要包裹卵母细胞的颗粒细胞与卵母细胞进行信号交互调控,从而达到核质同步成熟。GV裸卵没有颗粒细胞参与调控,虽然16小时后也排出第一极体,但这只是核成熟,胞质还未成熟,会影响实验结果。


  产品成分


IVM成分表.png

  质量控制

渗透压:300±3mOsmol

pH:7.2-7.4

通过无菌、无支原体及鼠胚检测