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IVM未成熟卵培养液

体外受精试剂耗材 2021-01-13

 IVM未成熟卵培养液用于在10-24小时内将小鼠未成熟卵(GV或MI)培养至MII。其中添加了EGF、重组FSH可有效提高成熟率及受精率。

 品名型号规格有效期价格备注
 IVM未成熟卵培养液M211510ml/瓶12300含BSA、双抗、FSH、EGF、酚红






  产品特点

●即用型培养液。以α-MEM为基础培养液添加了EGF和重组FSH,小鼠GV卵16小时成熟率可达80%,成熟卵IVF后受精率60-70%。
●可定制无血清或无钙 培养液。

  主要用途

未成熟卵母细胞培养。

  使用方法

●4℃保存应在3周内尽快用完。
●可- 20℃冻存,延长有效期。
解冻注 意事项:置于室温或掌心加热解冻,完全解冻后请反复颠倒混匀后使用或分装。室温静置解冻不混匀,培养 液在瓶内会形成渗透压梯度,导致胚胎死亡或发育不良,因此解冻后必须反复颠倒混匀。解冻后的培养 液必须进行预实验,验证囊胚形成率。
●使用前 请做滴盖油,在37℃、 5%CO2培养箱内平衡4小时以上后使用,推荐过夜平衡。
●小鼠未成熟卵(GV卵)促排卵方法(仅供参考)。

1、雌鼠注射PMSG后48小时,杀鼠获取卵巢,在M2培养液中用1ml注射器针头或胰岛素针头反复戳卵巢至棉絮状,在皿底寻找类似于煎鸡蛋结构的未成熟卵coc(颗粒细胞没有扩散紧密包裹在卵母细胞周围)。

2、如果是需要获取GV阶段裸卵,用拉制的90-100um针反复吹打未成熟卵coc,机械性剥离颗粒细胞,注意此时不需要用透明质酸酶消化颗粒细胞,此步骤与成熟卵coc获取MII阶段成熟裸卵不同,因为GV卵的颗粒细胞没有经过hCG的刺激,没有表达相应的透明质酸,因此无法用透明质酸酶消化GV卵COC,只能用机械剥离。

3、如果是要将GV卵培养至MII期,将未成熟卵coc放入提前准备的IVM培养液中培养16h。注意是未成熟卵coc,即完整的颗粒细胞包裹GV卵的coc,不是GV裸卵,在戳卵巢的皿底可以找到未成熟卵coc,也有GV裸卵,如果是进一步进行IVM培养,GV裸卵应该是废弃的,因为GV阶段发育至MII阶段,是需要包裹卵母细胞的颗粒细胞通过缝隙连接与卵母细胞进行信号交互调控,从而达到核质同步成熟。GV裸卵没有颗粒细胞参与调控,虽然16小时后也排出第一极体,但这只是核成熟,胞质还未成熟,会影响实验结果。

●详细使用方法请进入技术资料专栏。

  质量控制

每批次 培养液出厂前均通过严格而全面的质量检测(渗透压、Ph值、内毒素、支原体检测)和鼠胚质控(受精率 >90%,囊胚率>85%)。
查询质 量控制报告请点击--质控专栏。

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●造模鼠笼——低氧高氧造模通风鼠笼。

  产品成分

胎牛血清(FBS)5%
EGF3ng/ml
rhFSH50mIU/ml
丙-酮酸钠0.25mmol/L
青霉素0.5%
链霉素0.5%
α-MEM培养液基础培养液