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R18S3精子冻存液 M2720

体外受精试剂耗材 2021-01-13

R18S3精子冻存液是经典的小鼠精子冻存液,基于棉籽糖和脱脂奶粉配方,额外添加L-谷氨酰肽,提高精子存活率。本产品需配合H1310精子冷冻麦管使用。

 品名型号规格有效期备注
 R18S3精子冻存液M27202ml*10支/盒3
 附属试剂-硫代甘油100ul/支12

保存条件:精子冻存液室温避光保存请勿冻存,请勿4℃保存;MTG室温临时存放,4℃长期保存

本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途

  产品图片

精子冻存液.jpg

  冷冻步骤

1. 颈椎脱臼法处死成年雄鼠,腹部用75%酒精消毒后,剪开皮肤和肌肉,小心拉出睾丸,暴露附睾,用眼科剪分离脂肪、血管和韧带等组织,剪下附睾,放入120ul的冷冻保护剂液滴中,用1ml注射器划开附睾,待精子流出后,将组织去除,用移液器轻柔吹打使精子和冷冻保护剂充分混合。

镜子冻存液1.jpg                     镜子冻存液2.jpg

2. 将0.25ml麦管通过麦管连接器与1ml注射器连接(麦管连接器:将1ml注射器针头去掉,将200ul黄枪头尖端插入注射器,将麦管插入黄枪头),吸入约100ul HTF培养液,吸入1cm空气,再吸入10ul左右精子悬浮液,最后再吸入空气,用麦管封口机(本公司有售)热封口。(没有封口机可用金属镊子烧红后夹住麦管尾部封口,吸入100ulHTF培养液目的是防止麦管太轻飘在液氮表面)。

3. 在泡沫盒中倒入液氮,液氮液面距离泡沫盒最上缘约5-10cm,将麦管平放在泡沫盒边缘,液氮蒸汽预冷10分钟后用金属镊迅速将麦管浸入液氮中。

4. 精子冻存液中添加硫代甘油(Monothioglycerol,MTG)可有效提高精子复苏率。建议现配现用,或者添加MTG精子冻存液-20℃冻存不超过3个月,37℃解冻并反复颠倒混匀,请勿反复冻融,请勿将添加MTG的精子冻存液保存在4℃。MTG在精子冻存液内的终浓度为447uM,即0.04ul/ml。建议稀释步骤:(1)取一支2ml精子冻存液,加入16ulMTG,反复颠倒混匀,MTG终浓度为8ul/ml,此管为MTG浓缩液。(2)取10ulMTG浓缩液,加入另外1支精子冻存液中,反复颠倒混匀,MTG终浓度为0.04ul/ml。MTG浓缩液可以分装冻存,也可以用PBS或生理盐水稀释MTG,配制MTG浓缩液。


  解冻步骤

1. 水浴加热至37℃,用镊子将麦管从液氮罐中取出,迅速移到水浴中解冻15min。(冷冻后小鼠精子对环境适应性较弱,请动作迅速,小心操作)。

2. 从水浴中取出麦管,纱布擦干表面,将两端封口处剪开,通过连接管与1ml注射器连接,将精子悬液打入已经预热平衡好的200ul HTF培养液滴中,置于CO2培养箱获能50分钟。

3. 冷冻复苏精子的体外受精或ICSI,请参考本公司小鼠IVF技术资料。


  产品成分

精子冻存液成分表.png